正规elisa试剂盒

 elisa试剂盒
 规格：96T/48T
 上海梵态生物长期专业供应ELISA试剂盒，产品种类齐全，包括人、大小鼠、植物、鱼、牛、羊、马、猴、猪...等各种种属的ELISA试剂盒。
 我们是上海梵态生物 主要做elisa检测试剂盒的厂家
 【检测种属】人、大小鼠、豚鼠、兔、犬、牛、羊、猴、猪、昆虫、植物、农残，鱼类等种属ELISA试剂盒。
 有不清楚的随时联系我们
 试剂、标准品、 抗体、细胞、培养基、血清等
 

 实验原理：
 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔层粘连蛋白（LN）水平。用纯化的兔层粘连蛋白（LN）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入兔层粘连蛋白（LN），再与HRP标记的检测抗体结饣合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成疒蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的兔层粘连蛋白（LN）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中兔层粘连蛋白（LN）含量。
 

 


 elisa试剂盒 
 上海梵态生物长期专业供应ELISA试剂盒，产品种类齐全，包括人、大小鼠、植物、鱼、牛、羊、马、猴、猪...等各种种属的ELISA试剂盒。
 注：本公司提供试剂盒免费代测服务。需要其他检测试剂盒请咨询销售人员。
 实验原理：
 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中兔层粘连蛋白（LN）水平。用纯化的兔层粘连蛋白（LN）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入兔层粘连蛋白（LN），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的兔层粘连蛋白（LN）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中兔层粘连蛋白（LN）含量。
 试剂盒的组成
 elisa试剂盒样本处理及要求：
 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，上海梵态生物科技有限公司,应再次离心。
 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
 elisa试剂盒操作步骤
 1. 标准品的加样：设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；。
 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
 3. 加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。
 4. 温育：用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
 5. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
 6. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
 7. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
 8. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
 9. 测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
 注意事项：
 1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
 2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，正规elisa试剂盒，洗涤时不影响结果。
 3． 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间*控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
 4． 请每次测定的同时做标准曲线，正规elisa试剂盒，*做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请*乘以总稀释倍数（×n×5）。
 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
 6． 底物请避光保存。
 7． 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
 8． 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
 9． 本试剂不同批号组分不得混用。
 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
 保存条件及有效期：
 1.试剂盒保存： 2-8℃。
 2．有效期： 6个月
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